关键词:
载脂蛋白L1
膀胱肿瘤
肿瘤转移
摘要:
目的探讨载脂蛋白L1(APOL1)对膀胱癌进展的调控作用,并通过体外细胞实验验证其表达水平对膀胱癌细胞恶性表型的影响。方法本研究于2023年12月至2025年1月采用慢病毒介导的基因转染技术,在膀胱癌T24、J82细胞中分别构建APOL1过表达稳转细胞株及敲低稳转细胞株,实验分组分为阴性对照组(Ov-NC)、APOL1过表达组(Ov-APOL1)、阴性敲低对照组(Sh-NC)、APOL1敲低组(Sh-APOL1);运用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分别于培养0、24、48、72、96 h时间点进行细胞增殖检测;借助Transwell小室实验采用无血清培养基饥预处理细胞24 h,倒置显微镜下计数迁移至小室下室的细胞数量,评估细胞迁移及侵袭能力。结果成功构建APOL1表达上调、表达下调的膀胱癌稳转细胞模型;CCK-8实验证实,Ov-APOL1组自48 h起吸光度(A)值显著高于Ov-NC对照组[T24:(0.87±0.04)比(0.65±0.07)、J82:(0.89±0.11)比(0.65±0.06),T24:t=6.42,P<0.05;J82:t=4.90,P<0.05]。Sh-APOL1组A值显著低于Sh-NC对照组[T24:(0.52±0.01)比(0.70±0.04)、J82:(0.52±0.07)比(0.85±0.09),T24:t=11.11,P<0.05;J82:t=6.96,P<0.05]。Transwell迁移实验结果显示,Ov-APOL1组迁移细胞数显著高于Ov-NC组[T24:(511.70±8.50)比(224.30±11.59)、J82:(441.70±22.55)比(308.70±15.04),T24:t=34.62,P<0.05;J82:t=8.50,P<0.05]。Sh-APOL1组迁移细胞数显著低于Sh-NC组[T24:(73.67±7.37)比(157.30±11.93)、J82:(82.67±3.21)比(193.70±15.82),T24:t=10.33,P<0.05;J82:t=11.91,P<0.05]。Transwell侵袭实验结果显示,Ov-APOL1组侵袭细胞数显著高于Ov-NC组[T24:(414.00±33.45)比(191.00±13.89)、J82:(303.00±20.3)比(190.70±13.80),T24:t=10.66,P<0.05;J82:t=7.9,P<0.05]。Sh-APOL1组侵袭细胞数显著低于Sh-NC组[T24:(74.67±13.32)比(145.70±14.64)、J82:(79.67±10.69)比(157.30±25.79),T24:t=6.20,P<0.05;J82:t=4.82,P<0.05]。结论APOL1在膀胱癌中可能发挥促癌因子作用,可有效推动膀胱癌细胞的恶性进展。