关键词:
胆管肿瘤
N-乙酰氨基葡糖转移酶类
细胞增殖
细胞运动
信号传导
基因表达调控
肿瘤
摘要:
目的探讨葡萄糖氨基转移酶3(GCNT3)在胆管癌(cholangiocarcinoma,CCA)细胞增殖和转移中的作用。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)平台分析CCA患者肿瘤组织和癌旁正常组织中GCNT3 mRNA表达水平。通过免疫组织化学(IHC)染色实验检测CCA患者肿瘤组织与癌旁正常组织中GCNT3蛋白表达水平。将人胆管癌QBC939细胞分为A、B组,人胆管癌HUCCT1细胞分为C、D组,A、C组转染阴性对照慢病毒,B、D组转染GCNT3过表达慢病毒;再将QBC939细胞分为E、F组,HUCCT1细胞分为G、H组,E、G组转染siNC,F、H组转染siGCNT3。通过RT-qPCR技术和Western blot(WB)实验检测各组细胞中GCNT3 mRNA及蛋白表达水平;通过CCK-8、平板克隆、细胞划痕及Transwell实验评估各组细胞的增殖与迁移能力。结果基于TCGA平台分析结果显示,CCA患者肿瘤组织中GCNT3 mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(t=9.46,P<0.05)。IHC染色实验结果显示,CCA患者肿瘤组织中GCNT3的表达水平显著高于癌旁正常组织。RT-qPCR和WB实验结果显示,B组与A组相比、D组与C组相比,细胞中GCNT3 mRNA和蛋白的相对表达水平均显著升高(t=2.96~32.77,P<0.05);F组与E组相比、H组与G组相比,细胞中GCNT3 mRNA和蛋白的相对表达水平均显著降低(t=10.06~243.80,P<0.05)。细胞功能实验结果显示,B组与A组相比、D组与C组相比,细胞的增殖、迁移能力均显著升高(t=3.52~8.94,P<0.05);F组与E组相比、H组与G组相比,细胞的增殖、迁移能力均显著降低(t=3.07~12.87,P<0.05)。结论GCNT3在CCA患者肿瘤组织中呈高表达状态,其可增强CCA细胞的增殖和迁移能力。