关键词:
肺癌
黄芪
莪术
肿瘤免疫抑制微环境
CD8+T细胞
摘要:
目的 从CD8+T细胞抗肿瘤免疫功能及IL-6/JAK2/STAT3/PD-L1通路角度探讨黄芪-莪术抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的可能作用机制。方法 40只C57BL/6小鼠腋窝皮下接种Lewis细胞建立肺癌小鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、黄芪-莪术组、程序性死亡配体1(PD-L1)抗体组和联合组,每组10只。于造模第3天开始给药,其中黄芪-莪术组予黄芪-莪术溶液灌胃5.2 g/(kg·d),每日1次,并予每只小鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml,每3日1次;PD-L1抗体组予10 ml/(kg·d)蒸馏水灌胃,每日1次,腹腔注射PD-L1抗体10 mg/kg,每3日1次;联合组予黄芪-莪术溶液灌胃及腹腔注射PD-L1抗体,剂量和方式同上;模型对照组予蒸馏水灌胃及腹腔注射生理盐水,剂量和方式同上。各组均给药15天。每3日测量肿瘤体积,末次给药后测量肿瘤质量并计算抑瘤率、胸腺指数及脾脏指数;HE染色观察肿瘤组织病理学变化,流式细胞术检测肿瘤组织中CD8+T细胞表型,Western Blot法检测肿瘤组织中白细胞介素6(IL-6)、Janus激酶2(JAK2)、磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)、PD-L1蛋白表达,ELISA法检测肿瘤组织中白细胞介素10(IL-10)、干扰素γ(IFN-γ)和IL-6水平。结果 与模型对照组比较,各用药组胸腺指数、脾脏指数、CD8+T细胞、CD8+IFN-γ+T细胞、CD8+Gzm B+T细胞占比及IFN-γ升高(P<0.05),肿瘤体积、肿瘤质量与IL-10降低(P<0.01),其中PD-L1抗体组IL-6、p-STAT3表达升高(P<0.01),黄芪-莪术与联合组的CD8+TIM3+T细胞占比、IL-6水平、p-STAT3及PD-L1表达降低(P<0.05);与PD-L1抗体组比较,黄芪-莪术组肿瘤体积、肿瘤质量、IL-10升高(P<0.05),脾脏指数、CD8+T细胞占比、CD8+TIM3+T细胞占比及p-JAK2降低(P<0.05),联合组的CD8+Gzm B+T细胞升高(P<0.05)、IL-10降低(P<0.05),且两组的IL-6、p-STAT3表达降低(P<0.01);与黄芪-莪术组比较,联合组CD8+T细胞占比、p-JAK2、p-STAT3表达升高(P<0.01),肿瘤体积、肿瘤质量与IL-10降低(P<0.01)。各组JAK2、STAT3总蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 黄芪-莪术能够有效抑制Lewis肺癌荷瘤生长,促进CD8+T细胞分化与细胞毒性作用并改善其功能耗竭,改变肿瘤免疫抑制微环境,且黄芪-莪术与PD-L1抗体联用可进一步提高抑瘤率并改善免疫效应,其作用机制可能与抑制肿瘤组织IL-6/JAK2/STAT3/PD-L1通路相关。