关键词:
神经胶质抗原2
周细胞
血管新生
T淋巴细胞
肿瘤浸润
小鼠
摘要:
目的探讨神经胶质抗原2(NG2)缺失对机体免疫细胞组成及肿瘤发生发展的影响,并分析其可能的机制。方法选取6~8周龄雌性C57BL/6-Ly5.2(Ly5.2,CD45.2)小鼠14只(WT组)和NG2缺失小鼠14只(NG2-KO组)。两组各取4只小鼠,采用免疫荧光染色分析NG2缺失对小鼠血管结构及骨髓造血微环境的影响,流式细胞术分析骨髓、脾脏、肝脏及外周血中免疫细胞组成。两组各取5只小鼠,通过皮下接种MM-B16-F10黑色素瘤细胞、FSA-T241纤维肉瘤细胞和PDAC-Panc02胰腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,评估肿瘤生长情况,利用流式细胞术及免疫荧光分析肿瘤组织中免疫细胞浸润及T淋巴细胞亚群变化;通过CD31免疫荧光染色及FITC-葡聚糖外渗实验评价肿瘤血管密度及通透性;两组各取5只小鼠建立白血病模型,观察NG2缺失对白血病发生发展的影响。结果与WT组比较,NG2-KO组小鼠骨髓中巨噬细胞比例升高(P<0.05),中性粒细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05);脾脏中T淋巴细胞比例升高(P<0.01),中性粒细胞、巨噬细胞和B淋巴细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05);外周血中T淋巴细胞比例升高、巨噬细胞和B淋巴细胞比例降低(P<0.05),中性粒细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05);肝脏中T淋巴细胞比例升高、B淋巴细胞比例降低(P<0.01),中性粒细胞和巨噬细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。NG2-KO组小鼠肿瘤体积及质量低于WT组(P<0.05,P<0.01)。与WT组比较,NG2-KO组小鼠肿瘤组织中T淋巴细胞比例升高(P<0.01),其中CD4^(+)T淋巴细胞的比例比较差异无统计学意义(P>0.05),而CD8^(+)T淋巴细胞的比例升高(P<0.01)。与WT组比较,NG2-KO组肿瘤血管密度降低,而血管通透性增加(P<0.05,P<0.01)。WT组和NG2-KO组白血病小鼠外周血中GFP^(+)细胞比例随移植时间延长而呈升高趋势,但两组小鼠生存情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论NG2缺失能提高小鼠外周血、脾脏和肝脏中T淋巴细胞的占比,降低肿瘤血管新生的能力和增加肿瘤血管的通透性,促进CD8^(+)T淋巴细胞的肿瘤浸润,提高小鼠抗肿瘤免疫能力,但对白血病小鼠模型无明显抑制作用。提示NG2缺失促进了机体抗肿瘤免疫,并为今后开展靶向实体肿瘤的免疫治疗提供了一个新靶点。