关键词:
白血病,髓样
脐带血免疫细胞
治疗
免疫功能重建
摘要:
目的分析外源性补充脐带血免疫细胞对老年高危髓系肿瘤(MN)患者免疫功能重建及造血功能恢复的作用。方法研究分为临床研究和细胞实验两个部分。回顾性纳入2023年1月至2025年6月在天津医科大学第二医院血液内科收治的年龄>60岁的老年高危MN患者的临床资料,根据治疗方案不同,将患者分为化疗组(“3+7”方案治疗)、去甲基化治疗(HMA)组(地西他滨方案治疗)及脐血辅助(UCB)组(维奈克拉联合阿扎胞苷+脐带血回输治疗)。治疗后28 d,比较各组患者治疗后疾病缓解(完全缓解率)、造血功能重建(白细胞、血小板恢复时间)、生存情况(总生存率、无事件生存率)、细胞免疫功能重建[各种CD4^(+)T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤(NK)细胞等的水平]的差异。为进一步证实UCB成分细胞在MN患者骨髓微环境中的作用,收集3例UCB组老年高危MN患者的原代骨髓细胞(治疗第15天、回输UCB前分别行髂骨骨髓穿刺,各抽吸骨髓10 ml);并收集3名健康供者脐带血细胞(来源于中国山东省脐带血造血干细胞库,均为HLA 2/10相合、男性供者)。根据患者原代骨髓细胞及健康供者脐带血单个核细胞在Transwell小室内不同的接种方式,将细胞分为对照组(患者骨髓单个核细胞单独培养)、间接共培养组(患者骨髓单个核细胞与脐带血细胞非接触共培养)及直接共培养组(患者骨髓单个核细胞与脐带血细胞接触共培养)。各组细胞培养48 h后收集下室细胞及上清液,比较3组免疫细胞亚群比例差异(各种T细胞、B细胞、NK细胞亚群),并比较3组上清细胞因子水平差异[肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-6水平]。结果共纳入109例患者,男54例,女55例,年龄[M(Q_(1),Q_(3))]为68(60,87)岁;化疗组、HMA组及UCB组分别有38、39、32例。疾病缓解情况分析显示,UCB组[43.8%(14/32)比28.2%(11/39),P<0.001)]及化疗组[44.7%(17/38)比28.2%(11/39),P<0.001]的完全缓解率均高于HMA组。造血功能重建方面,UCB组白细胞恢复到目标数值的中位时间短于化疗组[22(14,28)比28(24,37)d,P<0.05]及HMA组[22(14,28)比31(21,42)d,P<0.05];UCB组血小板恢复到目标数值的中位时间短于化疗组[24(17,29)比28(23,33)d,P<0.05]及HMA组[24(17,29)比29(22,37)d,P<0.05]。生存分析表明,UCB组3年的总生存率高于HMA组(39.1%比19.7%,P<0.05),与化疗组差异无统计学意义(P>0.05);UCB组3年的无事件生存率高于HMA组(35.8%比25.5%,P<0.05),与化疗组差异无统计学意义(P>0.05)。细胞免疫功能重建方面,UCB组治疗后28 d的CD4^(+)中央记忆T细胞比例低于化疗组[20%(9%,29%)比32%(23%,39%),P<0.05],与HMA组差异无统计学意义(P>0.05)。UCB组治疗后28 d的CD4^(+)初始T细胞比例[45%(30%,58%)比22%(10%,34%)]和CD8+初始T细胞[41%(31%,52%)比22%(8%,36%)]均高于HMA组(均P<0.05),与化疗组差异无统计学意义(均P>0.05)。UCB组治疗后28 d的CD8+效应T细胞[40%(33%,50%)比18%(8%,28%)]、CD19^(+)B细胞[20%(13%,27%)比12%(7%,14%)]和NK细胞[20%(15%,26%)比14%(7%,21%)]比例均高于化疗组(均P<0.05),UCB组治疗后28 d的调节性T细胞比例低于化疗组[4%(4%,6%)比7%(7%,8%),P<0.05]及HMA组[4%(4%,6%)比8%(6%,12%),P<0.05]。细胞实验方面,免疫细胞亚群差异分析显示,间接共培养组CD8+初始T细胞、CD4^(+)初始T细胞、NK细胞、CD19^(+)B细胞亚群水平均高于对照组;调节性T细胞、CD4^(+)中央记忆T细胞水平均低于对照组(均P<0.05)。细胞因子水平差异分析显示,直接共培养组TNF-α、IFN-γ水平高于对照组,IL-6水平低于对照组(P<0.001)。结论脐带血中NK细胞等免疫细胞或对患者免疫功能重建及造血恢复有促进作用,并改善患者预后。