关键词:
肺腺癌
核苷酸代谢
生物信息学分析
胞外-5'-核苷酸酶
预后模型
肿瘤微环境
摘要:
目的 系统探索核苷酸代谢相关基因胞外-5'-核苷酸酶(ecto-5'-nucleotidase,NT5E)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的功能特性,为LUAD精准诊断及靶向治疗提供新的理论依据和潜在靶点。方法 基于癌症基因组图谱计划(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)等公共数据库对LUAD转录组数据进行多组学分析,筛选关键预后基因并构建预后模型。收集2023年5—6月康复大学青岛中心医院接受手术切除的LUAD患者组织标本进行预后基因验证,通过组织芯片进行蛋白表达验证;体外通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白质印迹法、划痕、Transwell、EdU、细胞周期及凋亡实验验证NT5E对LUAD细胞生物学行为的影响。结果 共纳入10对癌和癌旁组织标本用于关键预后基因验证,其中男4例、女6例,年龄(58.00±13.06)岁;纳入组织芯片90例,其中男28例、女62例,年龄(60.07±7.98)岁。生物信息学分析筛选获得以NT5E为代表的关键预后基因,证实其在LUAD组织中显著高表达。生存分析显示,NT5E高表达患者总体生存率明显降低,为不良预后的独立危险因素。qRT-PCR及组织芯片免疫组织化学进一步验证了NT5E在肿瘤组织中的高表达特征。体外功能实验表明,敲低NT5E可显著抑制LUAD细胞的迁移、侵袭及增殖能力,并显著提高细胞凋亡率,而过表达NT5E则产生相反效应。结论 NT5E可显著促进LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭并抑制凋亡,提示NT5E在LUAD发生、发展中具有重要促癌作用,可作为潜在的预后生物标志物及分子治疗靶点。