关键词:
Her-2阳性乳腺癌
脂质代谢
脂肪酸合成酶
代谢重编程
摘要:
目的探究脂肪酸合成酶(FASN)异常高表达在Her-2阳性乳腺癌中的作用, 及其通过调控脂质代谢重编程促进肿瘤恶性增殖的分子机制。方法收集52例Her-2阳性乳腺癌患者手术标本及30例癌旁正常乳腺组织, 通过Western blot检测FASN表达, 结合临床资料分析其与患者预后的相关性。利用LC-MS/MS检测组织及细胞内脂质代谢产物含量;在SK-BR-3通过siRNA敲低FASN, 采用CCK-8、平板克隆实验检测细胞增殖能力, 通过Western blot筛选FASN调控脂质代谢的下游信号通路;构建裸鼠皮下移植瘤, 验证FASN对体内肿瘤生长的影响。结果 Her-2阳性乳腺癌组织中FASN表达水平(1.90±0.20)明显高于癌旁组织(1.03±0.19), 差异有统计学意义(t=19.130, P<0.05)。FASN高表达组患者无病生存期和总生存时间[(28.68±3.22)个月、(32.47±3.58)个月]显著短于FASN低表达组[(45.28±4.19)个月、(48.76±4.39)个月, Log-rank χ^(2)=10.238、8.964, P<0.05]si-FASN组脂肪酸从头合成效率[(34.41±4.32)%]明显低于si-NC组[(44.88±4.64)%], 差异有统计学意义(t=5.227, P<0.05)。脂肪酸摄取实验中, si-FASN组[3H]-油酸掺入量[(27.87±4.91)%]明显低于si-NC组[(58.79±5.73)%], 差异有统计学意义(t=12.960, P<0.05)。Seahorse检测显示, si-FASN组细胞氧耗率[(38.31±4.91)%]明显低于si-NC组[(74.33±6.45)%], 差异有统计学意义(t=15.140, P<0.05)。si-FASN组SK-BR-3细胞中游离脂肪酸、甘油三酯和胆固醇相对水平(0.57±0.09、0.58±0.09、0.69±0.09)明显低于si-NC组(1.02±0.09、1.06±0.16、1.03±0.11), 差异有统计学意义(t=10.970、8.042、7.602, P<0.05)。si-FASN组SK-BR-3细胞棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)等饱和脂肪酸相对含量(0.53±0.11、0.47±0.09)明显低于si-NC组(0.98±0.09、0.97±0.08), 差异有统计学意义(t=9.991、12.840, P<0.05)。si-FASN组SK-BR-3细胞吸光度值(1.16±0.12)明显低于si-NC组(1.69±0.09), 差异有统计学意义(t=11.210, P<0.05)。平板克隆形成实验结果显示, si-FASN组克隆形成率组[(38.46±5.14)%]明显低于si-NC组组[(68.65±7.53)%], 差异有统计学意义(t=10.470, P<0.05)。si-FASN组SK-BR-3细胞中p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值(0.60±0.09、0.39±0.11)明显低于si-NC组细胞(1.01±0.14、0.89±0.17), 差异有统计学意义(t=7.684、7.679, P<0.05)。si-FASN组肿瘤体积和质量[(213.10±22.61) mm3、(0.23±0.03) g]明显低于si-NC组[(373.40±43.17) mm3、(0.53±0.06) g], 差异有统计学意义(t=10.400、15.750, P<0.05)。结论 FASN在Her-2阳性乳腺癌中异常高表达, 通过激活PI3K-Akt-mTOR通路调控脂质代谢重编程, 促进肿瘤细胞恶性增殖。