关键词:
重楼皂苷VI
金属有机骨架材料
靶向制剂
抗肿瘤
胰腺癌
摘要:
目的采用等网状金属有机骨架-1(isoreticular metal-organic framework-1,IRMOF-1)包载中药抗肿瘤活性成分重楼皂苷VI(polyphyllin VI,PPVI)并包覆穿膜肽构建靶向纳米制剂(PEG-PTP/PPVI@IRMOF-1),对其进行表征和体外抗肿瘤药效初步评价。方法通过“三乙胺沉淀法”和“反应包覆法”制备PEG-PTP/PPVI@IRMOF-1;利用粒径与ζ电位测定、扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)分析、傅里叶变换红外光谱(Fourier-transform infrared spectroscopy,FTIR)分析、热重分析(thermogravimetric analysis,TGA)、气体吸附(Brunauer-Emmett-Teller,BET)分析、X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)分析对其粒径、形貌、热稳定性、比表面积等性质进行表征;溶血实验评价纳米材料的生物安全性;CCK-8法评价材料安全性并检测纳米粒对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响;荧光显微镜观察材料及纳米粒对PANC-1细胞核形态的影响;激光共聚焦实验考察纳米粒的体外靶向性;克隆形成实验、划痕实验考察纳米粒对细胞增殖、迁移的影响;流式细胞仪检测纳米粒对细胞凋亡率和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响;激光共聚焦实验考察纳米粒对细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的影响。结果成功制备了靶向纳米粒PEG-PTP/PPVI@IRMOF-1,为干燥的白色粉末状。纳米粒外观为类球形,粒径为(177.47±3.97)nm,ζ电位为(-7.94±0.14)m V;PPVI@IRMOF-1的载药量为(43.02±0.08)%;纳米材料具有良好的生物安全性;靶向肽修饰后能够明显增强肿瘤细胞对药物的摄取,显著抑制细胞增殖,促进细胞中ROS的产生和MMP的下降,诱导肿瘤细胞的凋亡。结论制备的纳米粒形状均一,载药量较高,安全性良好,增强了PPVI的抗肿瘤疗效,能够为PPVI抗肿瘤制剂的开发提供参考。