关键词:
三氧化二砷
人血清白蛋白
精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸
胰腺癌
巨胞饮
摘要:
目的构建精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)环肽修饰人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)偶联三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)纳米药物,对其理化性质进行表征,并研究其体外抗胰腺癌药效和在胰腺肿瘤中的转运作用。方法通过砷硫键将HSA与ATO进行结合构建HSA-ATO纳米药物,进一步在表面修饰RGD构建RGDHSA-ATO纳米药物。分别使用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)、马尔文粒径仪检测HSA-ATO和RGD-HSA-ATO粒径、电位及多分散指数(polydispersity index,PDI)。使用电感耦合等离子体光谱仪(inductively coupled plasma spectrometer,ICP)分别检测HSA-ATO和RGD-HSA-ATO的砷含量,计算纳米药物的载药量。进一步构建共培养AsPC-1 mCherry/HPSC CMFDA肿瘤球模型,使用HSA-ATO和RGD-HSA-ATO处理肿瘤球模型,以ATO为对照,考察纳米药物的体外药效和转运。使用转运抑制剂考察肿瘤球摄取RGD-HSA-ATO的作用机制。结果本研究成功构建HSAATO和RGD-HSA-ATO纳米药物。测定结果显示,HSA-ATO和RGD-HSA-ATO粒径均一,分布均匀,粒径分别为(33.20±1.80)nm和(34.80±2.30)nm,呈负电性。ICP结果显示,HSA-ATO和RGD-HSA-ATO的载药量分别为(3.00±0.04)%和(2.99±0.06)%,体外释放具有pH和谷胱甘肽响应性。体外共培养模型结果显示,RGD和HSA修饰显著增强了药物在肿瘤球内的转运以及抗肿瘤药效。RGD-HSA-ATO干预144 h后,肿瘤细胞存活率仅为(57.33±1.88)%,显著低于ATO处理组。转运机制研究结果显示,RGD-HSA-ATO通过巨胞饮途径转运入肿瘤球。结论RGD-HSA-ATO显著增强了ATO在胰腺癌细胞中的转运和药效,为实现中药亲水性小分子抗肿瘤药物突破胰腺癌致密间质屏障,到达肿瘤组织深部发挥药效提供研究基础。