关键词:
香草扶正合剂
HuR
BIRC3
NF-κB P65
H22肝癌细胞
免疫功能
摘要:
目的:探讨香草扶正合剂(xiangcao fuzheng mixture,XCFZ)对H22荷瘤小鼠的免疫功能及肿瘤组织HuR、BIRC3、NF-κB P65蛋白表达的影响。方法:采用H22肝癌细胞株培养移植法建立肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,顺铂(DDP)组,XCFZ低、中、高剂量组,联合组,每组10只。造模第2天开始灌胃给予XCFZ低、中、高剂量水溶液,浓度分别为9.3、18.6、37.2 g/kg;顺铂组以5 mg/kg的顺铂溶液腹腔注射,同时以等量双蒸水灌胃,联合组以XCFZ中剂量灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组按照等量0.9%氯化钠溶液给药,每天1次,连续给药14 d称取小鼠体质量、瘤质量、脾脏及胸腺质量,计算抑瘤率,脾胸腺指数;肿瘤组织HE染色;透射电镜观察瘤组织细胞结构;流式细胞术检测CD3^(+)、CD4^(+)及CD8^(+)阳性细胞数并计算CD4^(+)/CD8^(+)比例;ELISA法检测小鼠血清细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-2、IL-10表达水平;RT-PCR及Western blot检测瘤组织中抗原R(HuR)、杆状病毒IAP重复3(BIRC3)、核转录因子-κB(NF-κB)相关mRNA和蛋白表达。结果:与模型组比较,联合组抑瘤率最高,显著优于其余各组,顺铂组去瘤后体质量最轻,联合组优于单纯顺铂组;与顺铂组比较,XCFZ各剂量组去瘤后体质量显著改善(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,XCFZ中剂量组改善脾胸腺指数优于其余各剂量中药组(P<0.05),联合组脾胸腺指数优于顺铂组(P<0.05)。模型组肿瘤细胞分布紊乱,多见核分裂及异性肿瘤细胞;XCFZ各组少见核分裂和异性细胞,多见孤立细胞及胞间空洞,甚至肿瘤细胞核固缩,出现较多肿瘤细胞坏死现象;顺铂组多见碎裂和固缩细胞核及多见胞间空洞,自噬体较多及伴随大量坏死细胞。XCFZ各剂量给药组组细胞质减少和胞内出现大量空泡。与顺铂组比较,XCFZ各剂量组和联合组CD3^(+)和CD4^(+)含量升高(P<0.05),与模型组比较,XCFZ各剂量组CD4^(+)/CD8^(+)显著升高(P<0.05或P<0.01),顺铂组显著降低(P<0.05)。与模型组比较,XCFZ各剂量组中剂量组炎症因子表达下降最为显著(P<0.05),且联合组降低各炎症因子表达水平明显优于其余各给药组(P<0.01)。与顺铂组比,联合组改善并降低INF-γ、TNF-α、IL-2、IL-10表达更为显著(P<0.01)。与顺铂组比较,联合组HuR、BIRC3和NF-κB P65 mRNA表达降低(P<0.05),其余XCFZ各剂量组表达更为显著(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,中剂量组及顺铂组HuR、BIRC3和NF-κB P65表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。与顺铂组比较,联合组抑制HuR、BIRC3和NF-κB P65表达效果更优(P<0.05或P<0.01)。结论:香草扶正合剂能有效抑制H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长,改善荷瘤小鼠体质量及免疫器官功能,增强T淋巴细胞介导的抗肿瘤免疫,其机制可能与抑制HuR、BIRC3、NF-κB P65蛋白表达有关。