关键词:
甘草黄酮A
结直肠癌
长链非编码RNA
网络药理学
AMPK/mTOR信号轴
抗肿瘤机制
摘要:
[目的]探讨甘草黄酮A(licochalcone A)通过长链非编码RNA(LncRNA)调控AMPK/mTOR信号轴抑制结直肠癌生长的分子机制。[方法]以人结直肠癌细胞HCT116及裸鼠皮下成瘤模型为研究对象,采用CCK-8、EdU检测细胞增殖,划痕试验、Transwell评估细胞迁移特性,运用qPCR技术检测增殖及迁移标志物表达水平,Western blotting法分析AMPK/mTOR通路相关蛋白表达模式。通过LncRNA测序筛选甘草黄酮A处理后HCT116细胞中的差异表达LncRNAs,再通过GO、KEGG富集分析其功能。借助裸鼠成瘤试验验证甘草黄酮A体内抗肿瘤效果,整合多数据库挖掘甘草黄酮A与结直肠癌作用靶点,构建蛋白质—蛋白质相互作用网络,筛选核心靶点并进行GO功能注释与KEGG通路富集分析,进一步通过上调LncRNA-CDC42BPA表达和RNA pull-down试验验证其功能和机制。[结果]甘草黄酮A可呈剂量依赖性抑制HCT116细胞增殖,抑制DNA合成和细胞迁移;处理后共鉴定出1 001个差异LncRNA(其中下调556个,上调445个),GO/KEGG分析显示富集于代谢及AMPK/mTOR通路。Western blotting结果证实甘草黄酮A可激活AMPK、抑制mTOR。网络药理学筛选出51个交集靶点,PPI网络显示AKT1、CASP3和EGFR为核心调控节点,且KEGG再次确认AMPK/mTOR为关键通路。LncRNA-CDC42BPA过表达可抑制HCT116细胞增殖和迁移,其机制上通过与PTBP1、FMR1结合,进而调控AMPK/mTOR信号通路。[结论]甘草黄酮A可通过调控LncRNA介导的AMPK/mTOR信号轴,抑制结直肠癌细胞增殖、迁移及体内肿瘤生长。