关键词:
SPTBN1
多倍体肿瘤巨细胞
乳腺癌
上皮-间充质转化
摘要:
目的:探讨βII血影蛋白(SPTBN1)对多倍体肿瘤巨细胞(PGCCs)迁移生物学行为的影响,并分析其在乳腺癌特别是三阴性乳腺癌(TNBC)中的临床意义。方法:通过生物信息学数据库TCGA、GEPIA2、UALCAN和The Human Protein Atlas分析SPTBN1在乳腺癌及泛癌中的表达模式、临床相关性及其诊断与预后价值。体外实验采用正常培养的TNBC细胞系MDA-MB-231作为对照组,氯化钴诱导MDA-MB-231形成的PGCCs作为处理组,通过Western印迹实验和实时荧光定量逆转录PCR检测SPTBN1及上皮-间充质转化(EMT)相关分子,包括周期昼夜节律调节因子1(PER1)、A激酶锚定蛋白12(AKAP12)、基质金属蛋白酶17(MMP17)、SRY盒转录因子9(SOX9)、Snail家族转录抑制因子1(SNAIL)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化。通过伤口愈合实验,分别在对照组和PGCCs组中检测敲低与未敲低SPTBN1对细胞迁移能力的影响。结果:SPTBN1在乳腺癌组织中表达显著低于正常组织(P<0.001),尤其在TNBC中下调最为明显(P<0.001)。与对照组相比,PGCCs组SPTBN1表达降低(t=5.575,P<0.0001),SNAIL、E-cadherin表达上调(t=12.030、7.463,均P<0.0001)、N-cadherin上调(t=4.176,P<0.01)和表达MMP17(t=3.505,P<0.01),细胞迁移与克隆形成能力增强(t=5.872、4.958,均P<0.01)。生物信息学分析显示SPTBN1与PER1、AKAP12、SOX9表达呈正相关(r=0.483、0.207、0.209,均P<0.001)。敲低SPTBN1(t=3.493,P<0.05)后PGCCs的EMT表型进一步加剧,表现为SNAIL表达升高(t=8.013,P<0.0001)、N-cadherin表达升高(t=3.982,P<0.01)以及E-cadherin表达下降(t=3.978,P<0.01),同时细胞迁移能力增强(t=4.091,P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明SPTBN1高表达与较差的总生存期相关(HR=1.51,P=0.00098),但可能为无复发生存期的保护因素(HR=0.75,P=0.00014)。受试者工作特征曲线显示SPTBN1对乳腺癌具有高诊断价值(AUC>0.96)。结论:SPTBN1在乳腺癌中低表达,其下调与PGCCs的EMT表型及恶性行为增强相关。SPTBN1可作为潜在的乳腺癌诊断与预后生物标志物。