关键词:
无功能性胰腺神经内分泌肿瘤
转录组学
肿瘤进展
标志物
预后
摘要:
目的解析无功能性胰腺神经内分泌肿瘤(NF-pNET)从G1级至G3级进展过程中的转录组动态特征,筛选持续差异表达的核心基因,并验证其预后价值。方法回顾性分析2015年1月至2020年12月间南京医科大学第一附属医院97例行手术治疗且经术后病理检查确诊为NF-pNET患者的临床资料。采集G1、G2、G3级患者手术切除的肿瘤组织样本,通过二代测序(NGS)技术获取转录组数据,筛选各级别间的差异表达基因(DEGs);对各组DEGs进行基因本体论(GO)功能注释与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集解析其生物学意义;通过质量控制-趋势筛选-阈值筛选策略确定与NF-pNET进展相关的持续差异基因;根据目标基因表达的中位值将患者分为高表达组和低表达两组,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并通过Log-rank检验分析持续差异基因与患者无瘤生存期(DFS)的关系,重点验证其在G2级亚组中的预后分层价值。结果随着NF-pNET病理分级的升高,肿瘤大小逐渐增加,原发肿瘤(pT)分期亦呈显著进展趋势,其中T3期占比从G1级的19.2%升高至G3级的63.6%;同时,异时性转移或复发发生率随分级升高而显著上升,由G1级的3.8%增至G3级的45.5%,患者DFS亦随分级升高明显缩短,上述差异均有统计学意义。转录组分析显示,不同分级间存在显著的转录组异质性:G2级相较于G1级、G3级相较于G2级分别筛选出4263个和6303个DEGs。在G3级与G1、G2级的共同DEGs中,胚胎源性基因XAGE5和AFP呈持续上调,而神经内分泌分化基因NEUROD6、NR5A1呈持续下调。功能富集分析显示,神经活性配体-受体相互作用、补体和凝血级联反应等通路为NF-pNET进展的关键通路。最终筛选出6个持续上调基因(ALDOB、FGB、FGA、POMC、TFF3、AVIL和8个持续下调基因(SLC14A1、PON3、EGR4、NEFM、ECE2、NPW、PLCE1、AGTR1)。生存分析结果表明,FGB高表达与总体患者及G2级患者的DFS缩短显著相关;而PON3、AGTR1高表达则与总体患者及G2级患者的DFS延长相关。结论FGB、PON3、AGTR1是贯穿NF-pNET分级进展全过程的核心差异表达基因,它们不仅可作为评估患者总体预后的潜在分子标志物,还能有效区分G2级患者的预后异质性,有望成为NF-pNET靶向治疗的新兴分子靶点。