关键词:
消镇康汤
肿瘤细胞
凋亡
网络药理学
分子对接
摘要:
目的探究消镇康汤含药血清体外抗肿瘤作用和网络药理学分析其抗肿瘤机制。方法48只雄性ICR小鼠随机分为空白组、消镇康汤低、高剂量组,每组16只。空白组给予灌胃生理盐水,消镇康汤低、高剂量组分别按5.6 g·kg^(-1)、11.2 g·kg^(-1)灌胃消镇康汤,连续7天。末次给药后1.5 h异氟烷麻醉,摘眼球取血,制备空白血清和消镇康汤低、高剂量含药血清。用10%消镇康汤低、高剂量组含药血清干预结肠癌HT29细胞、乳腺癌MCF-7细胞。采用CCK8法分别检测消镇康汤含药血清对HT29细胞、MCF-7细胞增殖的影响;采用Hoechst 33342染色法观察MCF-7细胞凋亡形态,Western blot法检测MCF-7细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平。数据库筛选消镇康药物活性成分及其作用靶点,与肿瘤相关靶点取交集。建立蛋白相互作用(PPI)网络,筛选PPI网络核心靶点,进行GO和KEGG通路富集分析。使用AutoDock Vina软件进行分子对接,模拟主要活性成分与关键靶点的结合强度。结果与空白组比较,消镇康汤低剂量组含药血清干预36 h、48 h后MCF-7细胞和处理72 h后HT29细胞存活率明显降低(P<0.05,P<0.01),消镇康汤高剂量组含药血清干预24 h、36 h后MCF-7细胞和处理48 h、72 h后HT29细胞存活率显著降低(均P<0.01)。与空白组比较,消镇康汤低、高剂量组MCF-7细胞亮蓝色荧光强度显著增加(均P<0.01),消镇康汤高剂量组MCF-7细胞Bax蛋白表达量明显升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05)。数据库筛选得消镇康汤活性成分55种,与肿瘤交集靶点371个。PPI网络核心靶点有TP53、AKT1、STAT3、JUN、HSP90AA1等。通路主要富集于癌症通路、PI3K-Akt信号通路等。分子对接结果显示,消镇康汤主要活性成分槲皮素、金黄紫堇碱、氢化小檗碱、豆甾醇、血根碱等与TP53、AKT1结合强度高。结论消镇康汤含药血清可抑制HT29细胞和MCF-7细胞增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能与调控PI3K-Akt信号通路有关。