关键词:
乳腺肿瘤
白细胞介素-37
CD8阳性T淋巴细胞
肿瘤微环境
摘要:
目的:观察白细胞介素-37(IL-37)在乳腺癌患者的表达变化对CD8^(+)T细胞活性的影响。方法:纳入2020年7月至2022年9月在新乡医学院第一附属医院就诊的46例乳腺癌患者、24例乳腺良性肿瘤患者、20例对照者。采集外周血,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),收集接受手术治疗的乳腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织,分离组织中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL),纯化CD8^(+)T细胞。ELISA法检测IL-37、可溶型单免疫球蛋白IL-1受体相关蛋白(SIGIRR)表达,实时定量PCR法检测组织中IL-37 mRNA,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞中IL-18受体α链(IL-18Rα)和SIGIRR表达。外源性IL-37刺激纯化的CD8^(+)T细胞,与乳腺癌细胞系MCF-7共培养,通过测定乳酸脱氢酶水平计算靶细胞死亡比例,ELISA法检测上清中穿孔素、颗粒酶B、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:乳腺癌患者血浆IL-37水平高于乳腺良性肿瘤患者[(554.17±96.63)pg/mL vs(499.52±78.66)pg/mL,P=0.020]和对照者[(483.97±47.23)pg/mL,P=0.003]。乳腺癌患者肿瘤组织中IL-37 mRNA相对表达量高于癌旁组织[(1.88±0.21) vs(1.00±0.53)pg/mL,P<0.001]。外周血IL-18Rα^(+)CD8^(+)细胞比例、SIGIRR^(+)CD8^(+)细胞比例、血浆可溶型SIGIRR水平在乳腺癌患者、乳腺良性肿瘤患者、对照者之间的差异无统计学意义(均P > 0.05)。CD8^(+)TIL表达IL-18Rα和SIGIRR的比例在肿瘤组织和癌旁组织之间的差异无统计学意义(P > 0.05)。重组人IL-37刺激后,CD8^(+)T细胞诱导靶细胞死亡比例、上清中IFN-γ和TNF-α水平在直接接触和间接接触共培养系统中均低于无刺激(均P<0.05)。在直接接触共培养系统中,IL-37刺激后上清中穿孔素和颗粒酶B水平均低于无刺激(均P<0.001),但在间接接触共培养系统中,上清中穿孔素和颗粒酶B水平在无刺激和IL-37刺激之间的差异无统计学意义(均P > 0.05)。结论:乳腺癌患者中IL-37水平升高可能参与诱导外周血和肿瘤微环境中CD8^(+)T细胞功能衰竭。