关键词:
C-C基序趋化因子配体2
铁死亡
宫颈癌
肿瘤相关巨噬细胞
肿瘤微环境
摘要:
从铁死亡角度探讨C-C基序趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2, CCL2)在肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)中对宫颈癌(cervical cancer, CC)进程的影响,并分析可能的作用机制。分别用靶向CCL2的短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA;sh-CCL2#1)以及CCL2过表达cDNA(ova-CCL2)的慢病毒转染宫颈癌细胞系HeLa细胞,采用CCK-8实验评估肿瘤细胞体外增殖能力,Transwell实验评估体外细胞的转移和侵袭能力。使用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA)诱导分化THP-1细胞,并与转染后的HeLa细胞以1∶4的比例组合共培养48 h。qRT-PCR和Western blotting分析巨噬细胞极化特征标志物的表达量。进一步使用铁死亡诱导剂erastin给药处理各组共培养细胞,检测分析巨噬细胞铁死亡特征标志物的表达量。结果显示,与NC组比较,CCL2过表达组HeLa细胞表现出依赖于巨噬细胞的肿瘤促进功能(P<0.001),且TME中巨噬细胞发生了M2型极化,铁死亡诱导剂erastin给药可以逆转这种极化。由此,HeLa细胞中CCL2上调促进TME中巨噬细胞发生M2型极化,进一步促进HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力,铁死亡诱导剂给药后改变巨噬细胞的极化进程,破坏TME稳态,抑制肿瘤细胞生物学功能。因此,可通过诱导肿瘤免疫微环境中的巨噬细胞发生铁死亡影响肿瘤进程。