关键词:
纳米羟基磷灰石
免疫原性细胞死亡
肿瘤治疗
阿霉素
生物相容性
抗肿瘤免疫治疗
摘要:
背景:近年来的研究显示,纳米羟基磷灰石在抗肿瘤领域展现出潜在价值,它能够选择性杀伤肿瘤细胞且对正常细胞没有明显毒性,但纳米羟基磷灰石抗肿瘤的机制尚不完全清楚。目的:探索纳米羟基磷灰石在体外诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡的能力。方法:采用化学沉淀法合成纳米羟基磷灰石,通过X射线衍射、傅里叶变换红外光谱和透射电镜表征纳米羟基磷灰石的物相、官能团及形貌尺寸,利用马尔文粒度仪测量纳米羟基磷灰石在PBS(pH=7.4)中的表面电荷。将不同质量浓度的纳米羟基磷灰石悬液、阿霉素溶液分别与L929小鼠成纤维细胞(或黑色素瘤细胞B16)共培养,CCK-8法检测细胞活力。将B16细胞分4组处理,分别加入PBS、100μg/mL纳米羟基磷灰石悬液、500μg/mL纳米羟基磷灰石悬液、1μg/mL阿霉素溶液,检测钙网蛋白暴露情况以及细胞上清中高迁移率族蛋白B1、三磷酸腺苷水平。结果与结论:①X射线衍射、傅里叶变换红外光谱检测显示纳米羟基磷灰石物相纯度高、结晶度良好,透射电镜下可见纳米羟基磷灰石呈均匀的棒状结构,长度70-90 nm,宽度10-20 nm,形貌规则,纳米羟基磷灰石的电位为(-12.83±2.04)mV。②CCK-8检测结果显示,100,500,2000μg/mL的纳米羟基磷灰石悬液均未显著影响L929成纤维细胞活力,0.1,1μg/mL阿霉素溶液显著降低了L929成纤维细胞活力;0.1,1μg/mL阿霉素溶液与100,500,2000μg/mL的纳米羟基磷灰石悬液均可降低B16细胞活力,并且纳米羟基磷灰石悬液对B16细胞活力的影响弱于阿霉素。③免疫荧光染色结果显示,500μg/mL纳米羟基磷灰石组钙网蛋白表达高于PBS组、阿霉素组(P<0.05);4组间高迁移率族蛋白B1水平比较差异无显著性意义(P>0.05);阿霉素组三磷酸腺苷水平高于PBS组(P<0.05)。④结果表明,纳米羟基磷灰石可能是一种潜在的安全有效的免疫原性细胞死亡诱导剂。