关键词:
醒脑静注射液
小胶质细胞
微小RNA-146a-5p
肿瘤坏死因子α
脓毒症相关脑病
摘要:
目的观察醒脑静注射液对活化小胶质细胞微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法选取BV2小胶质细胞为研究对象,BV2细胞100μl/孔接种于96孔板,培养箱预培养24 h后分别加入不同浓度醒脑静注射液(终体积浓度2、4、8 ml/L)或者磷酸盐缓冲液,采用CCK-8测定吸光度,计算细胞活性,分析不同浓度醒脑静注射液对BV2细胞活性的影响。BV2细胞接种于六孔板,贴壁后分成LPS组[培养板中加入终质量浓度1μg/ml的脂多糖(LPS)]、磷酸盐缓冲液对照组(培养板中加入等体积磷酸盐缓冲液)、XNJ组[培养板中加入醒脑静注射液(终体积浓度4 ml/L)预处理2 h后,再加入LPS溶液(终质量浓度1μg/ml)],培养8 h后离心收集上清液和细胞,分别要用于酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测TNF-α和细胞RNA提取miR-146a-5p。比较三组TNF-α水平,比较LPS组与XNJ组的活化BV2细胞miR-146a-5p表达。结果与磷酸盐缓冲液比较,不同浓度(2~8 ml/L)醒脑静注射液对BV2细胞活性无影响(P>0.05)。相对于磷酸盐缓冲液对照组的(50.57±11.06)pg/ml,LPS组的TNF-α(184.22±26.33)pg/ml明显升高(P<0.05),表明模型成功。相较于LPS组,XNJ组的TNF-α(129.58±20.36)pg/ml更低(P<0.05)。相比于LPS组,XNJ组的miR-146a-5p的表达更高[(4.65±0.89)vs.(6.29±0.62),P<0.05]。结论醒脑静注射液可以上调BV2小胶质细胞抑炎基因miR-146a-5p的表达,推测其可能参与了醒脑静注射液的抗炎过程。